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酵母表达系统具有遗传背景清晰、生长速度快、培养条件简单、安全性高等优势,因此酵母表达系统在蛋白质生产、药物研发、疫苗制备等领域具有广泛的应用前景。酵母表达系统是一种多功能真核表达系统,用于生产重组蛋白。它利用酵母细胞,如酿酒酵母(萌芽酵母)或毕赤酵母(甲基营养酵母)作为宿主生物,常见的为毕赤酵母表达系统。
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1.酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae):酿酒酵母,也称为芽酵母或面包酵母,是一种常用的蛋白质表达酵母菌株,该菌株适用于广泛的蛋白质表达,包括那些具有复杂结构的蛋白质。酿酒酵母具有广泛的应用,包括重组蛋白表达、代谢工程和研究各种细胞过程。
2.毕赤酵母(Pichia pastoris):毕赤酵母是另一种常用于重组蛋白表达的酵母菌株。它具有高水平表达、进行翻译后修饰的能力以及将重组蛋白分泌到培养基中等优点。巴斯德毕赤酵母是一种甲基营养酵母,是另一种流行的重组蛋白表达宿主,特别适合于分泌蛋白和膜蛋白的表达。众所周知,它能够产生高水平的重组蛋白并进行翻译后修饰,包括糖基化。巴斯德毕赤酵母具有强大且严格调控的甲醇诱导型启动子系统、高细胞密度生长以及将蛋白质分泌到培养基中的能力等优点。
3.乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis):乳酸双歧杆菌是一种非传统酵母,作为重组蛋白表达的宿主而广受欢迎,具有生长快、转化效率高和分泌重组蛋白的能力等优点。乳酸双歧杆菌通常用于生产异源蛋白质,包括酶和治疗蛋白质。
在酵母表达体系中,根据表达调控方式的不同,可以分为组成型表达和诱导性表达。
一、组成型表达
组成型表达是指在酵母细胞中,外源基因被整合到染色体上后,能够在没有特定诱导物的情况下持续稳定地表达。这种表达方式的优点在于操作简单,不需要额外的诱导物,且表达水平相对较高。然而,组成型表达也存在一些缺点,如可能导致酵母细胞的代谢负担加重,影响细胞的生长和存活率。
在组成型表达中,常用的酵母表达系统包括酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和毕赤酵母(Pichia pastoris)等。这些酵母具有强大的蛋白合成能力和良好的发酵性能,因此被广泛用于外源蛋白的生产。
二、诱导性表达
与组成型表达不同,诱导性表达是指在特定的环境条件下,通过加入诱导物来触发外源基因的表达。这种表达方式具有更高的灵活性,可以在需要时地控制蛋白的表达量和时间。此外,诱导性表达还可以减轻酵母细胞的代谢负担,提高细胞的生长和存活率。
在诱导性表达中,常用的酵母表达系统包括甲醇营养型酵母和半乳糖诱导型酵母等。甲醇营养型酵母如毕赤酵母,在甲醇作为碳源的培养基中能够表达外源蛋白。而半乳糖诱导型酵母则利用半乳糖作为诱导物,通过调控半乳糖代谢途径来触发外源基因的表达。
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