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一、抗体标记技术是什么？

抗体标记是指将标记物（酶，荧光素，生物素等）共价连接到抗体上，与待检测物（如某些特定抗原）特异性反应形成多元复合物，并借助于荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、电子显微镜和发光免疫测定仪等精密仪器对试验结果直接镜检观察或进行自动化测定，可以在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上对抗原、抗体反应进行定性和定位研究或应用各种液相和固相免疫分析方法对体液中的半抗原、抗原进行定性和定量测定。

二、常见的抗体标记技术有哪些？

抗体标记技术由于操作简单、灵敏度高，目前己被广泛用于医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药等领域的分析研究与技术测定，常见的抗体标记技术包括酶标记法，生物素化标记法，荧光素标记法和胶体金标记法等。

标记抗体是免疫电镜样品制备的一种常见方法，常应用于，，ICC，等实验。通过标记物的增强放大效应来定位分析抗原，是目前市面上理想的快速价廉的定量检测方法。抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等。

1、酶标记：，HRP标记单抗和多抗的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，随后与抗体蛋白的氨基结合，形成Schiff碱。常用的HRP的底物有邻苯二胺（OPD）、四甲基联苯胺（TMB）和ABTS等，其中WB、ELISA等实验中最常用的底物是TMB，经HRP作用后在3~5分钟由无色变蓝色，结果显色对比鲜明；加酸终止酶反应后变黄色。HRP酶标记结果即时可见、敏感性高。

2、：异硫氰酸荧光素（FITC）标记，FITC是最常用的荧光素，其原理是在碱性条件下，FITC 的异硫氰基能与IgG的自由氨基结合，形成IgG与荧光素的结合物，该荧光被捕捉后即可被检测到，目前市面上这种标记抗体大多被选择作为荧光二抗，可用于免疫组织化学单染或多重染色。荧光素经恰当的激发可发光，从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况，主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色，是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。

3、，现在应用广泛的是生物素-链霉亲合素系统，生物素与亲和素之间高亲和力的牢固结合以及交联放大效应，标记蛋白质这类大分子，再通过显色系统可以定量或者半定量地进行抗原分析。生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性，将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。

4、胶体金标记（GICT），蛋白质可与胶体金颗粒通过静电结合从而被吸附到其表面，由于胶体金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒。检测结果直接可以用颜色显示，肉眼判断容易，无需仪器设备。

5、化学发光标记，使用化学发光剂直接标记抗体，常用的标记发光剂是鲁米诺类，采用增强型的ECL发光体系作为发光底物试剂来实现标记检测。