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w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)在利用噬菌体构建多肽文库方面可以为您的研发工作提供专业的技术服务。在蛋白质相互作用的研究过程中,迫切需要一种高通量的筛选方案满足大量科研人员寻找蛋白质或酶配体的需求。w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)提供的噬菌体展示平台是一种超高通量的配体筛选方式,通过该技术平台可以构建多达1013/ml个经过噬菌体展示的多肽或抗体克隆,可以做到平均独立克隆数为109-1010/ml,经过后续多轮生物淘选可以提供多达105有效多肽或抗体的序列,为后续酶底物,蛋白配体和高特异性抗体搜寻提供坚实的研究基础。同时,配合w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)的亲和力筛选平台,可以在短时间内(2-3天)获得不同的多肽或抗体与靶点蛋白目标的亲和力排序,甚至精准亲和力的测定都可以完成。
目前,基于噬菌体展示平台,w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)可以为客户提供噬菌体展示的随机7肽文库,12肽文库,环7肽库产品供客户直接进行筛选,获得后续序列,并可提供M13噬菌体和T7噬菌体两种噬菌体文库构建试剂盒来定制客户想要的文库用于后续筛选。
噬菌体展示系统:
图1 噬菌体展示系统的分类
M13噬菌体展示系统:
M13噬菌体中主要使用pIII和pVIII衣壳蛋白来构建其展示系统。pIII分布在噬菌体颗粒的一端,可在N端的柔性连接区插入分子量较大的外源多肽/蛋白,因此可用来展示分子量较大的蛋白;pVIII主要分布在噬菌体颗粒的两侧,分子量较小,拷贝数较多,所以只适用于展示外源短肽,目前主要应用于筛选低亲和力的配体。
T4噬菌体展示系统:
T4噬菌体病毒颗粒的组装在宿主细胞内进行,并且其衣壳蛋白上有两个结合位点。所以该噬菌体常常用于研究不能被宿主分泌的复杂蛋白质,或者是同时展示两个不同性质的外源多肽/蛋白。展示的拷贝数也比较多。
T7噬菌体展示系统:
T7噬菌体常用来构建噬菌体展示系统的衣壳蛋白是10B,与M13相比,其无需经过分泌,可直接使宿主菌进行裂解。因此可用于展示无法在M13系统展示的对分泌过程有抑制作用的多肽/蛋白,此外,T7噬菌体的生产十分迅速,可节省大量时间,便于研究。
噬菌体展示肽库技术:
噬菌体展示技术提供了一种通过高效的生物淘选来分离和繁殖特定克隆的直接方法。这项技术有助于各种研究、医疗和工业应用,如抗体发现和工程、表位图谱、药物开发、疫苗设计等。与传统的杂交瘤方法相比,噬菌体展示法具有操作简便、效率高、宿主动物选择多样、免疫原性独立等特点。
噬菌体展示肽库属于生物合成肽库,是将合成的随机DNA序列插入到传染性丝状噬菌体外壳蛋白的编码基因中,从而使由该DNA片段编码的外源多肽可以与载体外壳蛋白相融合共同展示在噬菌体表面上,并且同时保持外源多肽的生物活性和载体感染宿主细菌的能力,这些所有显示不同肽的重组噬菌体集合就构成了噬菌体展示肽库。
随后对其进行亲和力筛选,富集出与目标蛋白结合的重组噬菌体并在E. coli中增殖。所以,这种重组噬菌体可以成为特异性抗原肽的无限来源,并且从理论上来说,当其库容足够大时,就可是从中筛选出任何所需肽片段甚至是非天然序列。这种筛选方法具有成本低,能够在体外扩增,并能简单快速地获得大量目标抗原肽等优点。
图2 噬菌体展示肽库构建原理及流程(以抗体库展示为例)
噬菌体展示肽库技术的应用:
-- 酶抑制剂、受体激活剂或拮抗剂等生物活性小肽的筛选
-- 抗原表位结构、作用机制等研究
-- 人工抗体合成的研究
w66最给力的老牌生物的优势:
-- w66最给力的老牌生物构建的定制多肽文库产品可高通量生产
-- 特异性强、灵敏度高并且可以准确定位抗原决定簇
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-- 噬菌体展示技术平台:为您提供数十种预制肽库筛选服务
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