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二抗是能和抗体结合的抗体,即抗体的抗体,是利用不同种属的抗体对宿主动物进行免疫,由异种动物的免疫系统产生的免疫球蛋白。二抗通常带有可以检测出的标记信号,例如荧光、放射性、化学发光或者显色基团,其主要作用是通过放大一抗的信号来检测底物的存在。由于一抗与蛋白的结合无法用肉眼查看到,且一抗只识别一种底物,这样成本高,工作量大,所以往往使用标记二抗与一抗结合的方法来识别底物。

二抗类型的选择基于一抗的类别,针对不同的实验方法选择不同的标记,一般来说需要参考免疫球蛋白IgG或IgM、标签类型和一抗来源宿主。一抗的V区与抗原结合后,标记的二抗将其V区附着在一抗的茎或C区上。利用这种相互作用可以使二抗间接地帮助检测和纯化目标蛋白(抗原)。抗体在科学研究、诊断和治疗中应用广泛,由于二抗在标记和检测方面比较灵敏和灵活,所以它们多用于一抗的比色、化学发光和荧光检测。偶联二抗(如酶或荧光团标记)可以用来观察抗原。一般做WB、 ELISA等实验推荐使用HRP标记的二抗,IHC推荐生物素标记的二抗,做IF、 FC等实验推荐荧光标记的如Alexa Fluor 488、FITC、PE标记的抗体。非偶联二抗也有很多应用,例如可以用于捕获和纯化一抗。二抗通过信号放大提高灵敏度,并为标记和检测提供了更大灵活性。

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