w66最给力的老牌

服务热线
400-621-6806

周一至周六

8:00-18:00

在线客服
销售支持二维码
 

流式细胞检测实验

2024-01-30 阅读(265)

流式细胞术(FCM)是一种根据不同荧光信号、波长对单个细胞进行多参数快速对比、分析和分选的技术,其原理是在压力作用下包裹在鞘液内的样品流进入激光照射,在仪器内完成光信号的收集,进一步将光信号转化为电信号,最后经过电脑的数据处理系统,将检测的结果呈现出来,呈现为更直观的散点图、直方图或其他类型的图。首先w66最给力的老牌在对样品处理成单细胞悬浮液,处理时要尽量减少气泡的产生;上机样品准备好后需在过滤后,再经过低温条件下荧光染料孵育;孵育完成后,才能进行上机操作。

 

 

 

流式细胞术最先应用于医学,对于免疫学、肿瘤学、细胞学等研究都十分重要,可以使用流式细胞术来对细胞进行分析检测,如应用于细胞的凋亡、细胞的分化和增殖特性等实验;流式还可以应用于植物方面如:细胞核分析、倍性分析等。流式细胞检测(FCM)是一种非常灵敏、准确且省时的处理大量样本的检测技术。

流式细胞仪对上机样本的要求高,首先,w66最给力的老牌要获得单细胞悬浮液,其次细胞的量一点要在1×10^6左右,细胞的量不宜太少,太少会影响变异系数,出现实验误差;样本细胞量也不宜过多,太多会导致再加入染色或抗体时,会出现结合不均匀的现象。还要注意的是如果同时要做两种标记,两种荧光标记的颜色一定不能一样。不同的实验目的会有不同的染色试剂,需要根据情况选择合适的染色液,且上机前30min就要加入染液进行避光孵育。以检测细胞周期为例,在检测细胞周期时,常用的染液是碘化丙啶(PI),PI可以结合dsDNA或碱基对中,荧光的强弱与和PI结合细胞的染色体多少有关,因此根据细胞的不同时期,DNA的含量会发生变化,可以在上机检测后,看出细胞的周期。

 

      

 

在使用流式细胞仪进行细胞凋亡的检测时,细胞的变化情况可以从上机后呈现的散点图上看出来细胞凋亡的时期,因为在凋亡早期阶段的细胞,它的膜结构仍然完整,细胞膜会阻止PI进入到细胞内,因此细胞位于右下象限;当细胞逐渐凋亡直到凋亡后期阶段,随着膜的渗透性增强,PI可以进入细胞,坏死细胞的图上的位置逐渐改变,呈现在散点图的右上象限。

 

w66给利老牌 w66给利老牌 w66给利老牌 w66给利老牌 w66给利老牌 w66给利老牌 w66给利老牌 利来w66