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1、在使用流式细胞分析仪进行细胞检测时，检测到的荧光信号较弱甚至没有荧光信号，是怎么回事？

答：

（1）检测样本：样本不足，需要补充样本的量；如：在检测细胞周期时，样品管内应有1×10^5-1×10^6个细胞，并且待测细胞最好是单细胞；

（2）用于检测的抗体失活，可能时存放时间过久或没有避光保存，可以使用新购买的抗体再次进行实验，排除抗体原因，同时需要考虑固定试剂的选择问题；

（3）可能是样品的一抗和二抗的种属来源不一致，如一抗为兔源，二抗为人源，需统一一抗二抗的种属来源，可以直接使用偶联物试剂盒或在抗体中加入合适的荧光染料。

（4）染色不充分，如；在检测细胞周期时，需在4℃或冰上使用荧光染料孵育30 min后，再上机检测。

2、为什么在流式检测时会产生高背景和噪音？

答：

（1）电压设置不当，应在空白对照上机时，将电压调至适宜位置；

（2）死细胞和碎片干扰，可以通过改变阈值，减弱死细胞和碎片对结果的干扰或在制样时，降低离心速度和时间保证细胞活力；

（3）细胞具有较强的自发荧光，应在上机前将细胞自发的荧光去掉或削弱。

（4）有细菌污染，在制备样品时，规范操作。

3、请问流式细胞术单抗直接荧光需要几种对照？

答：

首先要确认你用的直标抗体的荧光染料是什么，再确定该抗体的来源种属，选择相应的同型对照即可。

4、流式细胞检测结果能不能将空白对照和样品的检测结果放在一张图上？

答：

若是在检测时，是不可以的，w66最给力的老牌需要使用空白对照将检测电压等条件进行调试，在检测样品时，检测指数是不会变的，因此结果不会呈现在一个页面上；在对结果进行分析时，可以通过流式分析软件，进行结果图叠加，实现对照和样品结果在一张图上。