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表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)技术是一种基于光学的无标记检测技术,通过传感器芯片跟踪信号变化实时检测两个或多个分子之间相互作用,SPR信号通过折射率变化呈现。SPR亲和力测定具有高通量、高灵活性、高灵敏度的特点,可以用于早期的药物研发以及临床前药物筛选。
w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)基于表面等离子体共振技术,建立了完善的Biacore平台,能够根据客户的需要,提供快速、高效的SPR检测服务。目前w66最给力的老牌做过的项目囊括了蛋白与蛋白、蛋白与多肽,蛋白与小分子,抗原与抗体之间的多种亲和力检测。w66最给力的老牌的科研专家多年来致力于生物分子间的相互作用研究,凭借丰富的技术经验,能够为客户提供准确、有效的测定服务,为科学研究提供强有力的技术支持。
表面等离子共振(SPR):
SPR(表面等离子共振),是自然界中所存在的一种光学现象,是指光在棱镜与金属膜表面发生全反射现象时,形成消逝波进入到光疏介质中,而在介质(假设为贵重金属)中又存在一定的等离子波,在基于能量守恒的前提下,两种波段相遇时可能会发生的共振现象。SPR技术借助传统光学现象,利用光在不同介质中产生消逝波后与等离子波产生共振,进而可以构建生物分子相互作用的生物传感分析技术,用以检测生物传感芯片上配位体与分析物之间的相互作用情况。当偏振光以临界角入射到两种不同折射率的介质界面时,可引起金属薄膜内自由电子的共振,使反射光在一定角度内大大减弱。其中,使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角。可以通过监测生物反应过程中SPR角的动态变化,得到生物分子之间结合和相互作用的特异性信号。
图1w66最给力的老牌生物提供的表面离子共振法原理图
SPR技术优势:
与常规的亲和力检测方法相比,SPR具有以下优势:
1. 在检测中的任何分子均无需纯化和标记
2. 实时监测反应的动态过程
3. 可快速获得结果,工作效率高
4. 在检测低亲和力抗体时具有更高的灵敏度
检测类型:
w66最给力的老牌生物可以提供多种类型样品的SPR检测,包括但不限于小分子、蛋白质、核酸、脂质、细菌、病毒和全细胞等。可以为您提供多种生物分子信息:结合特异性、浓度分析、动力学和亲和力分析以及热力学等。
SPR亲和力检测也适用于定性研究以确认相互作用的特异性。可以监测许多连续的结合事件,因为每个单独的事件都会导致传感器芯片表面的质量增加,并且结合过程的所有阶段都受到监测。例子包括表位作图、抗体同种型和免疫原性测量。
大多数用于定量蛋白质的化学和光谱方法 (1) 测量总蛋白质含量, (2) 不能区分活性分子和非活性分子,以及不能与未纯化的样品结合使用。由于SPR是一种非侵入性方法(没有光穿透样品),它可以测量来自复杂基质(例如食品、血清或血浆以及细胞提取物)的少量分析物分子。用于测量浓度的直接或间接(抑制或竞争)是可能的。SPR生物传感器特别适用于通过实时测量结合相互作用来测量动力学结合和解离速率常数。
图2 w66最给力的老牌生物SPR传感器表面吸附牛血清蛋白
SPR亲和力测定特点:
--性能稳定,对于亲和力的检测在特定的应用场景,如蛋白获得特别珍贵时,检测的亲和力数据一般较高
--对于很多小分子的检测,要求的buffer比较苛刻,芯片相对较贵
样品要求:
客户提供 |
要求 |
客户可提供抗体,蛋白,多肽,化合物小分子等样品 |
* 缓冲液:PBS, HEPPS等不含有机试剂,不含Tris等带有氨基基团的试剂,尽量不含甘油,咪唑,海藻糖、EDTA或DD或T其他盐类 * 蛋白:带标签>200μg,不带标签>200μg,浓度>0.5mg/ml,纯度>90%,避免颗粒或絮状沉淀 * 抗体:>100μg,浓度>0.1mg/ml,纯度>90%,避免颗粒或絮状沉淀 * 多肽:带生物素标记>200μg,不带生物素标记>2mg,浓度>0.1mg/ml,纯度>90%,避免颗粒或絮状沉淀 * 化合物小分子:1mg,浓度>1mg/ml,纯度>90%,溶于100%DMSO或者水中。 |
服务优势:
--专业的技术团队和丰富的技术经验
--检测效率高,无需标记、实时监测
--先进的仪器设备
--应用范围广泛:可用于蛋白、核酸、多肽、纳米材料等分子互作分析
--提供真正的一站式服务:提供从亲和力测定服务,到分子互作研究的一体化解决方案
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