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w66最给力的老牌生物（KMD Bioscience）从事微生物基因编辑多年，已拥有了完善的基因编辑技术平台，w66最给力的老牌的基因编辑技术平台拥有经验丰富的技术人员，有效的实验流程以及完善的实验设备。w66最给力的老牌的科学家可根据客户的具体需求进行一对一的方案定制，提供多种微生物的编辑服务，以满足客户的需求。
毕赤酵母，是甲醇营养型酵母中的一类能够利用甲醇作为碳源和能源的酵母菌。与其它酵母一样，在无性生长期主要以单倍体形式存在，当环境营养限制时，常诱导2个生理类型不同的接合型单倍体细胞交配，融合成双倍体。其具有调控严谨，表达强度高，易于高密度发酵和能进行蛋白后修饰等优点，许多异源蛋白在毕赤酵母中成功表达。 此外，由于其具有作为细胞工厂的显著优点，除了重组蛋白外， S-腺苷-L-蛋氨酸和 D-阿拉伯糖等初级和次级代谢产物，也开始在毕赤酵母中进行生产。通过代谢工程改造不仅能够建立新的代谢通路，使菌株能够生产异源代谢产物，还能够调整菌株的代谢通量或删除一些代谢通路，从而提高同源蛋白或同源代谢产物的产生。因此毕赤酵母基因编辑在代谢工程中应用广泛。
传统λRed同源重组法：
毕赤酵母基因敲除的传统方法是利用其自身的Rec A同源重组系统编码的RecA和RecBCD蛋白介导DNA的同源重组。但是以该系统为基础的基因打靶存在较多的缺点：首先，由于RecBCD具有核酸外切酶活性，线性的打靶DNA将被降解，打靶基因必须整合于戴体上才能进行同源重组；其次，打靶片段需要较长的同源臂，往往长达几百个碱基，而且同源重组效率低，往往不能得到所需的重组子。
图1 传统λRed同源重组法
CRISPR/Cas9基因编辑技术：
CRISPR-Cas9基因编辑技术就是通过人工设计的 sgRNA（guide RNA）来识别目的基因组序列，并引导 Cas9 蛋白酶进行有效切割 DNA 双链，形成双链断裂，损伤后修复会造成基因敲除或敲入等，最终达到对基因组DNA 进行修饰的目的。相较于传统的同源重组敲除基因的方法，CRISPR-Cas9基因编辑技术速度更快，无痕，结果更准确，非常便于您开展后续的实验研究。
图2 CRISPR/Cas9基因编辑技术
服务内容：
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服务内容 |
周期 |
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基因敲除 |
客户提供： * 需改造的菌株信息：模式菌株/野生型菌株 * 敲除的序列信息：NCBI查询编号 |
2-3个月 |
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基因敲入或点突变 |
客户提供： * 需改造的菌株信息：模式菌株/野生型菌株 * 敲入的序列信息/突变位点信息 |
1-2个月 |
w66最给力的老牌生物科技多年致力于微生物基因组编辑服务，主要可为您提供传统λRed同源重组法和CRISPR/Cas9技术实现高度准确和有效的无痕基因组编辑。我司提供的微生物基因编辑系统主要包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、沙门氏菌、毕赤酵母、酿酒酵母、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和乳酸菌等。您也可以根据自己的需求指定其他微生物菌属，具体情况还需与w66最给力的老牌专业的技术人员联系。
交付：
--经过基因编辑且验证正确的菌株（抗性验证或测序验证）
--原始数据及完整项目报告
服务优势：
--项目开始前详细的评估方案
--快速的实验周期，节省客户成本
--实验过程中按阶段反馈项目进展，及时与客户沟通项目，促进项目快速运转
--成熟的实验技术，实现无疤痕基因组编辑
--多种微生物的基因编辑系统，适用于客户的多种项目
--可为新微生物开发 CRISPR 方法提供有力的技术支持
如何订购？
