w66最给力的老牌生物科技（天津）有限公司
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将外源基因转入宿主细胞内，可以稳定大量表达目的蛋白的细胞系称为稳定细胞系，筛选稳定细胞系是生物学研究过程中的关键一步。w66最给力的老牌生物（KMD Bioscience）多年来致力于稳定细胞株构建服务研究，建立了完善的细胞生物学技术平台，制定了不同类型细胞稳定株构建的标准实验流程，加之严格的流程管理体系，确保交付批次差异更小的稳定细胞系。并且拥有一整套慢病毒感染系统，研究开发出了多种基因操作载体系统，实现从基因合成、sgRNA设计、细胞转染、单克隆制备、到单克隆测序分析等真正一站式服务。依托于先进的技术与设备，w66最给力的老牌生物能够为客户提供优质的细胞稳定株构建服务。
在研究蛋白功能域的时候，常需要准确突变其中的1个或者几个碱基；同样，在研究蛋白定位的时候，需要在目的蛋白的N端或者C端加上一个荧光蛋白或者标签。w66最给力的老牌生物依托完善的CRISPR/Cas9的系统，开发了基因定点整合的平台，能够进行外源基因的定点整合表达，可准确的对客户感兴趣的基因位点进行编辑。
CRISPR/Cas9系统的基因编辑准确，操作便捷，可进行多重靶向修饰，是目前使用广泛的基因编辑技术。
利用IOS技术，w66最给力的老牌生物可通过针对靶基因的寡核苷酸识别序列，引导靶位点基因组构象变化；通过瞬时表达的重组蛋白识别靶位点并造成损伤，从而激发损伤修复机制；利用同源重组将外源功能基因（或正常的内源功能基因）插入基因组靶位点，准确实现目标基因的定点整合。
精确定点整合平台的应用：
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项目 |
服务内容 |
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基因标记 |
在DNA的5'端和3'端加上荧光蛋白基因或者标签基因 |
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基因定点突变 |
对目的基因的1个或者几个碱基进行准确突变 |
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基因定点整合 |
可以将靶片段整合到基因组上的某一具体位置 |
项目流程：
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步骤 |
周期 |
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基因合成及载体构建 |
1-2周 |
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细胞转染及阳性克隆筛选 |
2-3周 |
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单细胞克隆培养 |
1-2周 |
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单细胞验证 |
1周 |
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交付：稳定细胞系、实验报告 |
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--成熟稳定的细胞平台：拥有品种齐全的细胞库资源，多种不同启动子和标签的表达载体可供选择
--可提供各种哺乳动物细胞的稳转细胞系构建服务
--可提供基因敲除、过表达、沉默、定点整合等各种类型基因编辑服务
--表达范围广：重组单抗、蛋白、抗体或蛋白片段
--利用IOS技术，整合效率高，长期整合，可遗传，可以实现超高拷贝的基因整合
--设施齐全，拥有标准细胞实验室，实验体系成熟，配备齐全的实验仪器
--经验丰富的实验技术人员，精湛的操作水平，实验周期短，表达效率高
--细胞来源清晰可追溯，培养基商品化，质量有保证
--具备多种技术服务平台，能够提供从载体设计到重组蛋白生产等技术服务
稳转细胞系构建相关服务：
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类型 |
服务项目 |
技术优势 |
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基因敲除 |
为定点整合，非随机整合
稳定遗传，细胞传代过程中，目的基因不会丢失
整合有效性不受基因片段大小影响
细胞传代过程中，基因的沉默效率保证一致
定点整合的位点为高表达位点，基因的表达量高 |
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基因过表达 |
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基因沉默 |
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基因定点整合 |
