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重组蛋白植物表达服务

w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)多年来致力于重组蛋白表达与制备的研究,w66最给力的老牌的科学家拥有丰富的重组蛋白植物表达的经验,能够为客户提供快速准确的定制化服务,满足客户的项目需求。

植物作为一种生物反应器来生产医药用蛋白具有很多优点:1. 上游生产成本低;2. 基因转化容易,成功率高,周期短,表达量高,提纯容易,收效快;3. 转基因植物自交后得到的同质后代遗传性状稳定,进而能在植物体内积累多基因;4. 不受噬菌体污染倒灌的威胁,动物病原菌污染小;5. 对比其它表达系统而言,植物表达系统更适用于大规模生产。

 

w66最给力的老牌生物基于植物表达系统的特点,为客户提供3种表达系统:稳定遗传转化表达系统、瞬时表达系统和叶绿体系统。

 

不同植物表达系统的优点:

 

分类

特点

稳定转化系统

* 稳定转化系统是将外源蛋白基因构建在植物表达载体上,利用农杆菌或基因等转化的方法, 将目的基因转化到植物细胞中并与基因组整合获得稳定表达的转基因植株。核基因组转化虽然可以稳定遗传, 能进行高级蛋白加工和修饰,但是表达量小,因涉及组织培养过程,因此实验周期长,另外还存在基因漂移即环境、安全问题

叶绿体基因组转化

* 叶绿体转化系统是以叶绿体基因组为平台对植物进行遗传操作,通过一定方法使外源基因穿过细胞膜和叶绿体双层膜进入叶绿体在同源重组片段的介导下与叶绿体基因组之间发生同源重组以定点整合方式进入叶绿体基因组并在其中转录、翻译并获得终产 物的技术。叶绿体转化可以实现外源蛋白高效表达、稳定遗传 (胞质 )和转基因花粉无逃逸风险但无法完成复杂蛋白加工修饰,与原核生物类似

稳定蛋白表达(可选)

* 目的基因插入双元表达载体

* 转化农杆菌,体外表达外源蛋白

* 农杆菌和外源蛋白混合渗透烟叶,混合培养

* 继代培养,转基因培株,生产蛋白

  

服务内容:

 

项目内容

服务内容(以烟草为例)

周期

植物组织培养

* 培养烟草可以为农杆菌的渗透提供健康叶片

* 叶片生长至手掌大小,可用于农杆菌渗透

6-8周

基因克隆及载体构建

* 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因,插入农杆菌表达质粒

* PCR及测序检测确定亚克隆基因

* 交付:测序数据和实验方案

1-2周

瞬时蛋白表达

* 重组质粒转染农杆菌

* 农杆菌注射渗透烟叶中

* 提取纯化蛋白

* SDS-PAGE和WB检测

* 交付:重组蛋白0.1-3mg,纯度>85%,标准实验报告

3-4周

稳定蛋白表达(可选)

* 目的基因插入双元表达载体

* 转化农杆菌,体外表达外源蛋白

* 农杆菌和外源蛋白混合渗透烟叶,混合培养

* 继代培养,转基因培株,生产蛋白

 2-3年

  

生物反应器:

 

请参考:植物遗传转化服务

 

客户提供:

 

客户需提供目的基因序列或登录号,指定或提供生物反应器

 

交付内容:

 

--表达载体

--克隆农杆菌

--重组蛋白0.1-3mg,纯度>≥85%

 

如何订购?

 

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