w66最给力的老牌生物科技（天津）有限公司
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w66最给力的老牌生物的抗体开发平台经过多年项目开发的积累，具有开发性能媲美于细胞信号转导公司(CST)磷酸化的多克隆抗体和单克隆抗体。w66最给力的老牌能够为客户提供一站式磷酸化抗体制备服务，包括磷酸化多肽设计、实验方案设计及相关验证服务，磷酸化与非磷酸化的抗原交叉反应，Western Blot 和免疫组化等，以满足不同客户的项目需求。
蛋白磷酸化是细胞中重要的后翻译修饰作用(PTM)，主要涉及到蛋白生物活性水平的调节，包括活化或抑制蛋白质活性，从而进一步调节细胞信号转导通路。在真核生物中，蛋白质磷酸化位点为丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸；在原核生物中磷酸化位点主要为组氨酸。w66最给力的老牌生物可为客户提供基于噬菌体展示技术的磷酸化单克隆重组抗体制备服务。
w66最给力的老牌生物为客户提供的服务包括磷酸化位点的分析，磷酸化与非磷酸化多肽抗原设计与合成，噬菌体抗体文库构建以及抗体纯化与配对服务。
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步骤 |
服务内容 |
交付 |
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抗原设计与合成 |
* 客户提供抗原(多肽，蛋白)，纯度>90% * w66最给力的老牌设计与合成磷酸化与非磷酸化抗原（可选） |
(抗原由w66最给力的老牌制备） * 磷酸化与非磷酸化抗原的MS和HPLC报告 * 5 mg磷酸化多肽，纯度>90% * 5 mg非磷酸化多肽，纯度>90% |
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抗原偶联 |
*客户提供偶联抗原（KLH/OVA偶联磷酸化多肽5mg，BSA偶联磷酸化多肽5mg，BSA偶联非磷酸化多肽5mg） *w66最给力的老牌进行多肽偶联（可选） |
* 5 mg KLH/OVA磷酸化多肽，纯度>90% * 5 mg BSA磷酸化多肽，纯度>90% * 5 mg BSA偶联非磷酸化多肽，纯度>90% |
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动物免疫 |
方案一：免疫5 只Balb/c 小鼠(采用小鼠免疫佐剂，20天即可快速产生高抗体滴度血清)，ELISA检测血清效价 方案二：免疫2-3 新西兰大白兔（采用兔专用免疫佐剂，28天可产生高抗体滴度），ELISA检测血清效价(其他动物可选) |
* 1-2ml免疫前血清 * ELISA血清效价验证报告
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抗体噬菌体展示文库制备 |
* 收集免疫后的淋巴B细胞 * 提取mRNA，PCR克隆cDNA，噬菌体载体构建，转化，扩增 * 磷酸化与非磷酸化抗原进行抗体文库正筛和反筛 * 阳性克隆再进行扩增，穿梭质粒构建 * 小规模与大规模哺乳体系表达（293，CHO），抗体纯化与验证 |
* 重组表达质粒 * 2-5 mg 纯化重组抗体 * ELISA报告，含效价，交叉实验报告 * 抗体识别磷酸化抗原效价不低于104且不与非磷酸化抗原反应（ELISA） * Western Blot验证报告（可选）
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--高特异性：所制备重组单抗只识别特定磷酸化位点，与非磷酸化抗原无反应
--全程可追溯的文件支撑体系
--高抗体效价：保证型抗体ELISA效价可达104~105
--多种制备规模：5，15，80L 发酵罐级别可选
--自主优化的特异性抗体纯化技术，得到灵敏度很高的磷酸化抗体
--提供从抗原设计到抗体制备的一站式服务，快捷便利
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