w66最给力的老牌生物科技（天津）有限公司
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w66最给力的老牌生物（KMD Bioscience）多年来致力于抗体制备研究。w66最给力的老牌拥有经验丰富的抗体制备团队，积累了成熟的技术经验，具有齐全的抗体生产设备，能够为客户提供优质的重组单克隆抗体制备服务，包括兔源，鼠源，驼源，羊源，鸡源等。 单个B细胞抗体制备技术相较于传统的方法具有速度快、高通量、特异性强等优势。利用该技术从筛选获得的单B细胞中直接PCR获取编码抗体的基因，通过测序、表达载体构建、表达鉴定和纯化一站式服务，w66最给力的老牌生物能够为客户在较短的周期内生产出拥有高特异性和高亲和力的羊驼单克隆抗体。 |
羊驼单B细胞单克隆抗体制备：
羊驼产生两种类型的抗体：(i) 由重链和轻链二聚体组成的常规抗体，以及 (ii) 一类只具有重链不含轻链，被称为重链抗体（heavy Chain Antibody，hcAb）。如图1中D所示，羊驼重链抗体缺少轻链，由4个HC和2个VH组成，其中VH区域又被称为纳米抗体或单域抗体（single domain antibody，sdAb）。和传统抗体相比，羊驼抗体具有稳定性高、易于进行基因改造，免疫原性弱，特异性强，亲和力高，在真核或者原核系统中表达量高等众多优点。并因其与人抗体重链氨基酸序列高度相似，更易于进行人源化改造，在当前的抗体药研究领域中应用广泛。
单B细胞单抗制备技术是近些年来新兴的一种抗体制备技术。w66最给力的老牌生物利用此技术，从羊驼外周血或免疫器官中提取淋巴细胞，通过分选技术鉴定和分离出特定的B细胞后将其进行单细胞培养，使用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和抗体特异性引物鉴定单B细胞分泌抗体的特异性，通过PCR技术扩增出特异性抗体基因，将其克隆到表达载体中，并在客户指定的系统中进行表达，纯化好的抗体通过ELISA等方法进行表达验证。w66最给力的老牌生物利用单B细胞单抗制备技术获得的抗体品质出众，且成功率高。
图1 A，传统IgG；B,传统抗体Fab片段；C，传统抗体的单链Fv片段；D，重链抗体或驼类抗体；E，驼类抗体的VH区域或单域抗体（sdAb）
制备流程：
服务内容：
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步骤 |
服务内容 |
交付材料 |
周期 |
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抗原制备（可选） |
半抗原改造/完全抗原制备 |
改造产物及鉴定结果 |
具体分析 |
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动物免疫 |
抗原乳化，免疫羊驼4-5次； ELISA效价测定； 抗血清采集 |
免疫血清； ELISA检测结果； 实验记录 |
8-10周 |
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B细胞富集和筛选 |
PBMC分离； FACS Assay、ELISA Assay； |
高通量筛选结果报告， 保证序列多样性的FACS binder； ELISA检测结果报告，阳性克隆株 |
6-8周 |
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B细胞抗体测序 |
RT-PCR； 高通量测序 |
测序原始数据； 特异性序列 |
1周 |
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抗体表达与纯化（可选） |
抗体小规模转染或放大 |
表达质粒，纯化抗体 |
具体分析 |
样品要求：
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客户提供 |
要求 |
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重组蛋白 |
* ≥3.5 mg，要求蛋白纯度>85%，蛋白要求分子量大于10 kDa，可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化，需额外提供15 mg左右重组蛋白 |
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多肽与小分子 |
* 裸肽≥15mg，多肽纯度>90%，不少于10个AA，偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白；小分子需要预先对结构进行评估 |
服务优势：
--周期短
--不限种属
--可获得抗体序列
--得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
--丰富的经验积累
--严格的质控体系
--服务可定制：提供个性化定制服务满足客户的实际需求
如何订购？
