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w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究。公司拥有专业的抗体制备技术人员,积累了多年的抗体制备经验。w66最给力的老牌坚持提供高质量的抗体生产服务,建立了成熟完善的抗体制备平台,能够为客户提供不同物种的单克隆抗体定制服务。凭借多年的噬菌体展示技术项目经验,w66最给力的老牌已成功实现牛单克隆抗体的生产制备,特别是具有超长CDR3(Complementarity Determining Region 3)的抗体。
在抗体相关研究中,牛可以产生具有超长CDR3环和少数可变区域的抗体。天然条件下,大约10%的牛抗体含有这种超长CDR3结构域,该环形成一个类似绳结的形状并主要介导了抗体对抗原的亲和力,使其具有更高的抗原结合能力。为了克服与长环相关的构象熵损失机制,牛利用二硫键来固定超长CDR3结构域。w66最给力的老牌承诺为客户提供高免疫亲和力的牛单克隆抗体制备以及相关检测服务,保证交付量,满足实验需求。
牛单克隆抗体特点:
牛单克隆抗体在研究抗原结构方面具有独特的优势。牛抗体的超长CDR3环是其他物种中最长的CDR3环(50-61个氨基酸),有利于识别深藏的表位。相关结构和深度测序分析表明,CDR3超长环含有偶数个半胱氨酸,形成一种独特的结构,其中半胱氨酸参与构成由β链“柄”支撑的多样化二硫键“旋钮”结构域。这种长CDR3环使牛抗体更有效地攻击各种细菌和病毒或抓住分子目标,特别是传统抗体无法识别的抗原,如GPCRs。w66最给力的老牌自主设计的实验方案,可以更大程度得获得高纯度、特异性强的牛单克隆抗体。
w66最给力的老牌生物能够提供基于噬菌体展示技术的牛单克隆抗体制备服务。w66最给力的老牌也可以根据您的需求,为您制定个性化的实验方案,如多肽抗原的设计,蛋白抗原的制备等。
牛单抗制备流程:
服务项目流程:
步骤 |
服务内容 |
周期 |
抗原准备与动物免疫 |
* 注射抗原,进行5-7次免疫 * 采集血清,ELISA检测血清效价 * 提供免疫详细报告 |
10-14周 |
细胞分离 |
* 收集免疫后的牛血进行细胞分离 * 分选抗原特异性免疫细胞 * cDNA文库建立 |
1-2周 |
基因扩增 |
* PCR扩增目的基因 * 测序 |
4-5周 |
融合抗体表达 |
* 构建载体 * 融合抗体表达 * 筛选阳性克隆 |
6-7周 |
功能验证 |
* BLI验证 |
1周 |
样品要求:
客户提供 |
要求 |
重组蛋白 |
* ≥3.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供15mg左右重组蛋白 |
多肽与小分子 |
* 裸肽≥15mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估 |
交付结果:
--所有单克隆抗体超长CDR3H序列信息及原始数据
--来自血液、淋巴和脾细胞的B细胞(>5x106/项目);cDNA文库,3-4瓶/项目
--构建完成的表达载体
--高纯度融合抗体(>90%)
--实验报告和原始数据:包括SDS-PAGE、ELISA检测等结果,并根据客户需求,提供抗体验证结果,如Western Blot、SPR等
服务优势:
--pM级的亲和性和高特异性
--丰富的经验积累,娴熟的操作水平,提高细胞融合成功存活率,保证实验成功率
--严格的质控体系,标准化的操作流程,保证交付高质量的抗体
--多种抗体纯化技术与方案可供选择
--抗原免疫多样化:可接受蛋白,多肽以及各种小分子抗原,能够完成从抗原制备到抗体生产的一站式技术服务
--抗体检测方法多样化:ELISA,WB,SPR等多种抗体质量检测技术,能够全面的评估抗体质量
--完善的平台建设:拥有成熟的抗体、蛋白平台,多种表达体系可供选择,多种免疫途径,同步实验,为得到更优质的单抗提供了保证
--完整的结果分析,提供详细实验流程报告以及交付产品
--服务可定制:提供个性化定制服务满足客户的实际需求
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