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w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)多年来致力于抗体制备研究。w66最给力的老牌拥有经验丰富的抗体制备团队,积累了成熟的技术经验,具有齐全的抗体生产设备,能够为客户提供优质的重组单克隆抗体制备服务,包括兔源,鼠源,驼源,羊源,鸡源等。
小鼠的繁殖速度快,体型小,所需周期短,并且对饲养条件要求不高,各个品系经过几十年的验证,更加稳定,免疫反应明确。由小鼠产生的鼠单克隆抗体作为常见的单克隆抗体,具有特异性强,批次间差异小等特点,并且一般不会产生背景交叉反应。单个B细胞抗体制备技术相较于传统的方法具有速度快、高通量、特异性强等优势。利用该技术从筛选获得的单B细胞中直接PCR获取编码抗体的基因,通过测序、表达载体构建、表达鉴定和纯化一站式服务,w66最给力的老牌生物能够为客户在较短的周期内生产出拥有高特异性和高亲和力的鼠单克隆抗体。
单B细胞单抗制备优势:
类目 |
单B细胞技术 |
杂交瘤技术 |
噬菌体展示技术 |
抗体 |
天然 |
天然 |
非天然 |
抗体亲和力 |
高 |
高 |
中等 |
可成药性 |
高 |
高 |
低 |
时间 |
16~20周,可选快速免疫 |
20~26周,可选快速免疫 |
16~20周,可选快速免疫 |
抗体基因序列 |
直接获得 |
需要进一步测序 |
直接获得 |
抗体多样性 |
高 |
中等 |
中等 |
所能筛选的种属 |
不限种属 |
鼠、兔 |
不限种属 |
鼠单B细胞技术(single B)抗体制备:
w66最给力的老牌生物单B细胞单抗制备基于流式细胞分选技术,利用每个B细胞只产生一种特异性抗体的特性,直接从单个B细胞中扩增出抗体基因,通过重组表达获得特异性抗体。基于单B细胞技术,可以在完成动物免疫后直接从外周血中获取阳性B细胞并克隆抗体基因序列,得到的鼠单克隆抗体具有高特异性、高活性和高亲和力等突出优势。为了满足客户的不同需求,w66最给力的老牌生物能够提供从抗原设计,合成与修饰,到动物免疫,单B细胞富集筛选,表达与纯化,功能验证等一站式技术服务。
制备流程:
服务内容:
步骤 |
服务内容 |
交付材料 |
周期 |
动物免疫 PBMC分离 |
免疫小鼠4-5次 ELISA效价测定 外周血采集 PBMC分离 |
ELISA检测结果 标准实验记录 PBMC,1×106 cells*10支 |
4-10周 可选择标准免疫或快速免疫 |
流式分选 |
PBMC流式分选 |
标准实验结果记录 |
1-2个工作日 |
单B细胞 培养筛选 |
5~20板96孔板单B细胞培养和ELISA筛选 |
阳性克隆筛选结果 标准实验记录 |
2~3周 可选其他增值验证方法 |
阳性克隆测序 |
至少20个阳性克隆进行RT-PCR和测序 |
RT-PCR结果 测序原始数据 特异性序列 标准实验记录 |
1周 |
载体构建 抗体表达纯化 |
哺乳表达载体构建 细胞转染 ELISA验证 |
至少3个阳性克隆序列 表达载体 纯化抗体500ug/个阳性克隆 ELISA检测结果 标准实验报告 |
5~6周 可选其他增值验证方法 |
样品要求:
客户提供 |
要求 |
重组蛋白 |
* ≥2.5 mg,要求蛋白纯度>85%,蛋白要求分子量大于10 kDa,可溶性蛋白浓度在0.5~5mg/mL之间。若要求抗原亲和纯化,需额外提供10 mg左右重组蛋白 |
多肽与小分子 |
* 裸肽≥10 mg,多肽纯度>90%,不少于10个AA,偶联KLH/BSA/OVA或其他载体蛋白;小分子需要预先对结构进行评估 |
服务优势:
-- 周期短
-- 不限种属
-- 可获得抗体序列
-- 得到的抗体具有更高的特异性和亲和力
-- 丰富的经验积累
-- 严格的质控体系
-- 服务可定制:提供个性化定制服务满足客户的实际需求
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