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w66最给力的老牌生物(KMD Bioscience)多年来致力于建立完善的细胞培养平台,w66最给力的老牌能够提供给客户多种细胞学基础实验。依托于优越的技术设备和完备的平台,能够为客户提供优质的细胞凋亡检测服务。此外,w66最给力的老牌的实验室拥有先进的免疫荧光显微镜和流式细胞仪等系统,能为客户提供高质量的成像技术,为您的科研结果增色。根据客户的实际要求,w66最给力的老牌生物能够建立一套完整的实验方案,提供从细胞处理与制片,荧光显微镜观测和拍照等一站式实验服务,提升客户体验。
细胞凋亡(Apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。作为细胞的一种基本生物学现象,细胞凋亡是机体为更好地适应生存环境,而主动争取的一种死亡过程,是一个高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用,一般过程包括4个阶段,即:诱导启动、细胞内调控、实施和凋亡细胞的吞噬搬运。w66最给力的老牌生物所提供的细胞凋亡检测服务,可用于检测不同类型、不同时期细胞凋亡状况及分析凋亡细胞比例。针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。
w66最给力的老牌生物提供的凋亡检测以“PI和Annexin-V双标”方法为主。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyl serine,PS)高亲和力特异性结合,在正常细胞中,PS只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的PS由脂膜内侧翻向外侧,因此Annexin V成为了检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。w66最给力的老牌将Annexin V 进行荧光素标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将采用Annexin V-PI双标技术,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。同时,依托自身的免疫荧光成像平台,w66最给力的老牌生物能为客户提供高质量的图片数据。
细胞凋亡检测服务 — Annexin V /PI双染色法:
项目 |
细胞凋亡检测服务 |
实验原理 |
* 在细胞凋亡早期,位于细胞膜内侧的PS迁移至细胞膜外侧。Annexin V是一种钙依赖性的磷脂结合蛋白,它和PS具有高度的结合力。因此,Annexin V可以作为探针检测暴露在细胞外侧的PS。故利用对PS有高度亲和力的Annexin V,将Annexin V标记上荧光素(如异硫氰酸荧光素FITC),用流式细胞仪即可检测凋亡细胞。而PI染料能够与细胞内的DNA结合,区分坏死细胞和活细胞。早期凋亡细胞和活细胞的细胞膜仍然完整,PI染料无法自由通过细胞膜进入细胞内与DNA结合,所以PI染料无法标记凋亡细胞和活细胞,而PI染料却能够通过坏死细胞的细胞膜与细胞内的DNA结合,坏死细胞内PI染料被488nm激光激发后会发射红荧光,被相应通道接收。所以Annexin V和PI同时使用,可以区分活细胞、早期凋亡细胞和坏死细胞。 |
应用 |
细胞凋亡检测可应用于: * 肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究 * 临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗 * 对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价 |
细胞凋亡检测服务主要实验流程:
步骤 |
周期 |
材料培养 |
1周 |
药物处理 |
1-2周 |
材料染色 |
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荧光成像或流式细胞检测 |
服务优势:
--保证细胞活力,制作高质量的细胞爬片
--熟练的实验操作水平和完善的实验流程,对细胞研究具有丰富的知识储备,能够保证检测结果客观准确
--提供详细完整的实验报告,包含实验原始结果,每一项实验参数,可直接用于论文的撰写
--完备的仪器平台:拥有多类型显微镜和流式细胞仪等重要仪器,具有高分辨率等特点,节约珍贵样本的同时即可获得详尽的数据
--提供细胞培养、细胞染色和图片拍照等一站式技术服务
实验案例:
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